制備工藝與質(zhì)量控制
CRM-AZA1原多甲藻酸-1標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備遵循國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備規(guī)范(ISO Guide 34),通過多環(huán)節(jié)純化與驗(yàn)證確保量值準(zhǔn)確可靠,核心流程如下:
1 原料提取與純化
原料來源于2005年愛爾蘭海域收集的天然污染無殼貝類組織,經(jīng)愛爾蘭海洋研究所完成初步提取與純化后,由加拿大哈利法克斯國(guó)家研究委員會(huì)進(jìn)行最終精制。純化過程采用高效液相色譜等技術(shù)去除雜質(zhì),確保目標(biāo)物純度達(dá)到98%以上,為后續(xù)定值奠定基礎(chǔ)。
2 結(jié)構(gòu)與純度驗(yàn)證
采用多種正交技術(shù)對(duì)純化后的AZA1進(jìn)行全面表征:CRM-AZA1原多甲藻酸-1標(biāo)準(zhǔn)溶液通過核磁共振(NMR)光譜確認(rèn)其獨(dú)特的螺旋結(jié)構(gòu)及羧基、胺基官能團(tuán);利用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)和液相色譜-高分辨率質(zhì)譜(LC-HRMS)驗(yàn)證純度,其中HRMS測(cè)得(M+H)?離子準(zhǔn)確m/z為842.5037±0.0004(△=-1.5ppm),與理論值(C??H??NO???)高度吻合。
3 溶液制備與封裝
首先將純化AZA1溶解于氘代甲醇(CD?OD)中,通過定量核磁共振(qNMR)技術(shù)完成準(zhǔn)確定值,制備成儲(chǔ)備液;隨后用脫氣高純甲醇對(duì)儲(chǔ)備液進(jìn)行精確稀釋,得到目標(biāo)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。為防止氧化和揮發(fā),溶液在氬氣保護(hù)下于冰浴中冷卻,快速分裝至經(jīng)氬氣吹掃的干凈琥珀色玻璃安瓿中,立即火焰密封,全程控制氧暴露和溫度波動(dòng)。
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